Pirogeni ed endotossine batteriche
Un pirogeno è una molecola che provoca febbre. Alcuni batteri producono pirogeni chiamati endotossine ed esotossine. Le endotossine si trovano nella parete cellulare dei batteri Gram-negativi; le esotossine sono molecole che alcuni batteri fabbricano all’interno e secernono all’esterno. Endotossine ed esotossine vengono liberate quando un batterio va incontro a lisi. Le endotossine si presentano in forma di lipopolisaccaridi (LPS).
Qualunque superficie entrata in contatto con dei batteri può essere contaminata da pirogeni. Anche il modo in cui conservate il materiale sterilizzato conta: uno stoccaggio inadeguato può favorire la comparsa di pirogeni. Le endotossine aderiscono volentieri alla vetreria e sono difficili da eliminare con acqua e sapone. L’autoclavaggio può sterilizzare la superficie della vetreria, ma le endotossine che aderiscono alle pareti sono di norma troppo termoresistenti per essere eliminate. Occorre esporle a lungo a calore secco elevato (per esempio 250 °C per 30 minuti). Si ritiene che l’autoclavaggio e l’ebollizione non distruggano tutte le endotossine presenti. In altre parole, la depirogenazione è più difficile della sterilizzazione.
Un articolo apparso su Applied Environmental Microbiology (agosto 2009) descrive un nuovo procedimento idrotermale blando di depirogenazione che assicura una denaturazione completa delle endotossine. Il procedimento idrotermale blando è stato condotto a 130 °C per 60 min oppure a 140 °C per 30 min, in presenza di un elevato grado di saturazione del vapore o con un sistema a flusso. Gli autori hanno mostrato inoltre che l’acqua poteva essere purificata alle stesse temperature e durate, senza ulteriore ultrafiltrazione né scambiatore di anioni. Questo procedimento ad alta saturazione di vapore si presta bene ai preparati parenterali e ai dispositivi medici che non sopportano le alte temperature dei trattamenti a calore secco.
Per saperne di più sul procedimento idrotermale blando:
Inactivation of Escherichia coli Endotoxin by Soft Hydrothermal Processing
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