Pyrogènes et endotoxines bactériennes
Un pyrogène est une molécule qui provoque de la fièvre. Certaines bactéries produisent des pyrogènes appelés endotoxines et exotoxines. Les endotoxines se trouvent dans la paroi cellulaire des bactéries à Gram négatif ; les exotoxines sont des molécules que certaines bactéries fabriquent à l’intérieur et sécrètent vers l’extérieur. Endotoxines et exotoxines sont libérées lorsqu’une bactérie se lyse. Les endotoxines se présentent sous forme de lipopolysaccharides (LPS).
Toute surface entrée en contact avec des bactéries peut être contaminée par des pyrogènes. La façon dont vous conservez le matériel stérilisé est un autre facteur : un stockage inadéquat peut favoriser l’apparition de pyrogènes. Les endotoxines adhèrent volontiers à la verrerie et sont difficiles à éliminer à l’eau et au savon. L’autoclavage peut stériliser la surface de la verrerie, mais les endotoxines qui adhèrent aux parois sont généralement trop thermorésistantes pour être éliminées. Il faut les exposer longuement à une chaleur sèche élevée (par exemple 250 °C pendant 30 minutes). On considère que l’autoclavage et l’ébullition ne détruisent pas la totalité des endotoxines présentes. Autrement dit, la dépyrogénation est plus difficile que la stérilisation.
Un article paru dans Applied Environmental Microbiology (août 2009) décrit un nouveau procédé hydrothermal doux de dépyrogénation qui assure une dénaturation complète des endotoxines. Le procédé hydrothermal doux a été conduit à 130 °C pendant 60 min ou à 140 °C pendant 30 min, en présence d’un taux de saturation en vapeur élevé ou avec un système à flux. Les auteurs ont également montré que l’eau pouvait être purifiée aux mêmes températures et durées, sans ultrafiltration supplémentaire ni échangeur d’anions. Ce procédé à forte saturation en vapeur convient bien aux préparations parentérales et aux dispositifs médicaux qui ne supportent pas les températures élevées des traitements à chaleur sèche.
Pour en savoir plus sur le procédé hydrothermal doux :
Inactivation of Escherichia coli Endotoxin by Soft Hydrothermal Processing
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